Polski
PGT-A (PGS-NGS 360°™)
Diagnostyka preimplantacyjna zarodka
Co to jest diagnostyka PGT-A?
Diagnostyka PGT-A - preimplatation genetic testing (nazwa własna w Laboratorium INVICTA to PGS-NGS 360°™) to najnowocześniejsze genetyczne badanie zarodka. W laboratorium PGT INVICTA, do tej diagnostyki wykorzystujemy platformę sekwencjonowania następnej generacji - NGS. Wykorzystanie tej techniki sekwencjonowania genomu ludzkiego (bezpośredniego odczytu informacji genetycznej) do badania zarodków, otwiera nowe możliwości diagnostyczne.
W przeszłości, wybór zarodka dokonywany był przede wszystkim na podstawie jego morfologii. Do analizy chromosomów wykorzystywano także metody FISH oraz mikromacierzy. Obie obarczone jednak były ograniczeniami zakresu bądź dokładności. W ramach PGT-A (PGS-NGS 360°™) analizuje się wszystkie 24 chromosomy z niespotykaną dotąd precyzją. Daje to lekarzom niezwykłą szansę pomocy parom, które narażone są na zwiększone ryzyko wystąpienia nieprawidłowości genetycznych u przyszłego potomstwa.
Aneuploidie chromosomowe (nieprawidłowa liczba chromosomów) stanowią jedną z głównych przyczyn niepowodzenia programów IVF. Większość zarodków z aneuploidiami nie zagnieżdża się w macicy, a te, które zostaną zaimplantowane często ulegają poronieniu w pierwszym trymestrze ciąży. Diagnostyka preimplantacyjna wykorzystywana w celu optymalnego wyboru zarodków do transferu znacznie zwiększa szanse na powodzenie procedury i narodziny zdrowego dziecka.
Wyniki programów IVF po wykonaniu PGT-A (PGS-NGS 360°™) z wykorzystaniem NGS.
PGT-A to diagnostyka w kierunku aneuploidii wszystkich 24 chromosomów.
Dlaczego warto wykonać badanie zarodka PGT-A?
- Analizuje wszystkie chromosomy autosomalne oraz płciowe
- Pozwala zdiagnozować jeszcze na etapie zarodka najczęstsze wady genetyczne m.in. zespół Downa, Edwardsa, Patau, Turnera, Klinefeltera
- Zwiększa wskaźnik implantacji zarodków
- Redukuje ryzyko poronień
- Zwiększa liczbę zdrowych urodzeń
- Zwiększa efektywność transferu pojedynczych zarodków, zmniejszając liczbę mnogich ciąż
Tabela 1. Wyniki badań skuteczności programów IVF u pacjentów z nawracającymi niepowodzeniami implantacji (z ang. RIF - Repeated Implantation Failure) z zastosowaniem PGS-NGS 360°™.
Pierwsze na świecie zastosowanie w praktyce klinicznej technologii NGS (Next Generation Sequencing) w diagnostyce preimplantacyjnej Laboratorium Genetyczne INVICTA: sierpień 2013 r.
| Wyszczególnienie | Pacjenci RIF z PGT-A (PGS-NGS 360 ˚™) | Pacjenci RIF bez PGT-A (PGS-NGS 360 ˚™) |
|---|---|---|
| Liczba cykli IVF z transferem | 45 | 53 |
| Liczba biopsji zarodków | 252 | n.a. |
| Liczba przetransferowanych zarodków | 65 | 89 |
| Średnia liczba transferowanych zarodków | 1.4 | 1.7 |
| Średni wiek pacjentki | 34 | 34.4 |
| Wskaźnik ciąż klinicznych | 84,4% (38/45) | 41,5% (22/53) |
| Wskaźnik implantacji | 0.615 | 0.348 |
Wskazania do wykonania diagnostyki PGT-A (PGS-NGS 360°™)
- Zawansowany wiek matki ( AMA – advanced maternal age – zgodnie z definicją kobiety powyżej 35 roku życia)*
- Zespół wielokrotnych niepowodzeń implantacji – RIF (Recurrent Implantation failure)*
- Nawracające poronienia - RM (Recurrent Miscarriages)*
- Czynnik męski – SMF (severe male factor )*
- Nieudane programy zapłodnienia pozaustrojowego (przy transferze zarodków o prawidłowej morfologii) )
- Nawykowe poronienia
- Zdiagnozowane wady genetyczne płodu we wcześniejszej ciąży lub urodzone chore dziecko
- Obciążony wywiad genetyczny – występowanie wad genetycznych w rodzinie
- Wskazania do transferu pojedynczego zarodka w programie in vitro
- Wykluczenie wad genetycznych u wcześniej zamrożonych zarodków
- Zwiększenie szans na uzyskanie ciąży w cyklu IVF z komórkami dawczyni
- Obawy przed urodzeniem dziecka z wadami chromosomowymi
*(zgodnie wytycznymi z ESHRE PGT Consortium good practice recommendations for the organisation of PGT. Hum Reprod Open. 2020)
Proces współpracy
Ograniczenia
Ten test jest przeznaczony do wykrywania aneuploidii i/lub nieprawidłowości pochodzących z translokacji Roberstonowskich. Test ten nie wykrywa częściowych aneuploidii (dotyczących tylko fragmentu chromosomu) oraz mozaikowatości chromosomowej, strukturalnych nieprawidłowości chromosomów (np. delecji fragmentu chromosomu, inwersji, duplikacji), disomii uniparentalnej, triploidii i tetraploidii.
Literatura
- 1. Łukaszuk K, Pukszta S, Wells D, [et.al.]. Routine use of next–generation sequencing for preimplantation genetic diagnosis of blastomeres obtained from embryos on day 3 in fresh in vitro fertilization cycles. J.FertilSteril. 2015 Jan 23.
- 2. Scott RT Jr, Ferry K, Su J, Tao X, Scott K, et al. (2012) Comprehensive chromosome screening is highly predictive of the reproductive potential of human embryos: a prospective, blinded, non–selection study. FertilSteril 97(4): 870–875.
- 3. Fiorentino F, Biricik A, Bono S, Spizzichino L, Cotroneo E, Cottone G, Kokocinski F, Michel CE. Development and validation of a next–generation sequencing–based protocol for 24–chromosome aneuploidy screening of embryos. FertilSteril. 2014 May;101(5):1375–82. doi: 10.1016/j. fertnstert.2014.01.051. Epub 2014 Mar 6.
- 4. Fiorentino F1, Bono S2, Biricik A2, Nuccitelli A2, Cotroneo E2, Cottone G2, Kokocinski F3, Michel CE3, Minasi MG4, Greco E4.Application of next–generation sequencing technology for comprehensive aneuploidy screening of blastocysts in clinical preimplantation genetic screening cycles. HumReprod. 2014 Dec;29(12):2802–13. doi: 10.1093/humrep/ deu277. Epub 2014 Oct 21.
- 5. Anderson SH, Stankewicz–McKinney T, Glassner MJ, Hanshew K, Ketterson K, et al. (2013) Similar pregnancy and implantation rates following day 6 embryo transfer or frozen embryo transfer (FET) after blastocyst biopsy for preimplantation genetic screening (PGS). FertilSteril 100(3): S37.
- 6. Ata B, Kaplan B, Danzer H, Glassner M, Opsahl M, et al. (2012) Array CGH analysis shows that aneuploidy is not related to the number of embryos generated. Reprod Biomed Online 24(6): 614–620.
- 7. Balmir F, Hughes M, Jenkins J, Stelling JR (2013) A pilot study comparing fluorescence in situ hybridization (FISH) analysis in preimplantation genetic screening (PGS) to array comparative genomic hybridization (aCGH) technique. FertilSteril 100(3): S206.
- 8. Brezina PR, Brezina DS, Kearns WG (2012) Preimplantation genetic testing. BMJ 345:e5908.
- 9. Colls P, Coates A, Peters A, Acacio B, Roche M, et al. (2013) Preimplantation genetic diagnosis at blastocyst stage by array comparative genomic hybridization. Error rate determination. FertilSteril 100(3): S196.
- 10. Fishel S, Thornton S, Dowell K (2011) A new era of PGS for IVF – will it yield the anticipated improved efficiency? J Fertil In Vitro 1:1.
- 11. Forman EJ, Hong KH, Ferry KM, Tao X, Taylor D, et al. (2013) In vitro fertilization with single euploid blastocyst transfer: a randomized controlled trial. FertilSteril 100(1): 100–7.e1.
- 12. Fragouli E, Wells D (2011) Aneuploidy in the human blastocyst. Cytogenet Genome Res 133(2–4): 149–159.
- 13. Fragouli E, Wells D (2012) Aneuploidy screening for embryo selection. SeminReprod Med 30(4): 289–301.
- 14. Handyside AH (2010) Preimplantation genetic diagnosis after 20 years. Reprod Biomed Online 21(3): 280–282.
- 15. Handyside AH (2013) 24–chromosome copy number analysis: a comparison of available technologies. FertilSteril 100(3): 595–602.
- 16. Harasim T, Roesemann M, Heinrich U, Wagner A, Schiller J, et al. (2013) Detection of genetic mosaicism during preimplantation genetic diagnosis (PGD). In: Abstracts of the 12th International Conference on Preimplantation Genetic Diagnosis; Reprod Biomed Online 6 (suppl 1).
- 17. Harton G, Braude P, Lashwood A, Schmutzler A, Traeger– Synodinos J, et al. (2011) ESHRE PGD consortium best practice guidelines for organization of a PGD centre for PGD/preimplantation genetic screening. Hum Reprod 26(1): 41–46.
- 18. Keltz MD, Vega M, Sirota I, Lederman M, Moshier EL, et al. (2013) Preimplantation Genetic Screening (PGS) with Comparative Genomic Hybridization (CGH) following day 3 single cell blastomere biopsy markedly improves IVF outcomes while lowering multiple pregnancies and miscarriages. J Assist Reprod Genet 10: 1333–1339.
- 19. Lee, H–L, Hodes–Wertz B, Alexis A, Lee T–L, McCulloh D, et al. (2013) Preimplantation genetic screening improves IVF success rate in women over 40. FertilSteril 100(3): S83.
- 20. Ata B, Kaplan B, Danzer H, Glassner M, Opsahl M, et al. (2012) Array comparative genomic hybridization screening in IVF significantly reduces number of embryos available for cryopreservation. ClinExpReprod Med 39(2): 52–57.
- 21. Lorwatthanasirikul J, Quangkananurug W, Rattanajitr T, Chanchamroen S, Sawakwongpra K (2013) Comprehensive chromosome screening with vitrified warmed single blastocyst transfer increases the pregnancy rate in advanced maternal age. In: Abstracts of the 12th International Conference on Preimplantation Genetic Diagnosis; Reprod Biomed Online 6 (suppl 1).